制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)。為了縮短分離時(shí)間和提高分離效率，制備型液相色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致色譜柱的分離負(fù)荷相應(yīng)加大，因此必須加大色譜柱填料，增大柱內(nèi)徑和柱長，使用的流動(dòng)相相對(duì)增多。然而，當(dāng)色譜柱上的樣品負(fù)載加大時(shí)，往往會(huì)導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純產(chǎn)品。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾，對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來說，要少用填料，少用溶劑，盡可能多的得到產(chǎn)品。
一、樣品的前處理：
制備型液相色譜柱分離的樣品多，比分析型液相色譜柱更容易受污染，樣品前處理非常必要。
二、TFA在緩沖液中的作用：
1、TFA起到類似離子對(duì)的作用，一般濃度在0.05%～0.1%。濃度過高會(huì)使溶液偏酸，長時(shí)間使用可能影響色譜柱壽命。
2、TFA可抑制硅膠表面的硅醇基，改善堿性化合物的峰形。若0.1%TFA分離不好，可加大濃度到0.2%，但用完后要及時(shí)沖洗色譜柱。
3、走梯度時(shí)走成基線漂移，但對(duì)制備影響不大。
三、降低柱壓的方法：
采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
四、提高檢測下限的方法：
1、如果是等度洗脫，一定要改成單元等度。
2、盡量采用乙腈－水系統(tǒng)洗脫。乙腈紫外吸收小，相同條件下噪音小。
五、用水要求：
不含金屬離子和細(xì)菌。
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